微生物染色技術(shù)以及染色的基本原理

發(fā)布時間:2016-07-08 17:21:32 文章分類： 點(diǎn)擊數(shù)：

微生物染色技術(shù)

微生物細(xì)胞個體微小、透明且含水量高(一般為80％～90％)，微生

物細(xì)胞懸浮于水溶液中時，其對光線的吸收和反射與水溶液差別不大，

與周圍背景沒有明顯的明暗差，因此。難于看清其形態(tài)．更談不上識別

其細(xì)微結(jié)構(gòu)。所以．微生物細(xì)胞需要經(jīng)過染色后，借助染料的反襯才能

把菌體和背景區(qū)分開，從而能在顯微鏡下進(jìn)行觀察。微生物學(xué)發(fā)展到現(xiàn)

在，已形成很多染色技術(shù)，這些技術(shù)除能對菌體染色外，還能對細(xì)胞內(nèi)

部或外部的細(xì)微結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色，染色技術(shù)已成為微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的最基

本技術(shù)之一。

 

 

染色的基本原理

 

微生物染色的基本原理是根據(jù)微生物菌體和染料的特性，通過物理

(細(xì)胞和細(xì)胞物質(zhì)對染料的毛細(xì)管現(xiàn)象、滲透作用和吸附作用等)和化學(xué)

因素(細(xì)胞物質(zhì)和染料的化學(xué)性質(zhì)不同而發(fā)生各種各樣的化學(xué)反應(yīng))的相

互作用來實(shí)現(xiàn)的。酸性物質(zhì)對于堿性染料吸附力較強(qiáng)．吸附作用穩(wěn)固，

如酸性的胞核對于堿性染料就易于吸附；同理，堿性物質(zhì)吸附酸性染料

能力強(qiáng)。如果要使酸性物質(zhì)染上酸性材料．必須改變它們的物理狀態(tài)(

比如細(xì)胞的pH)才利于吸附作用；反之，堿性物質(zhì)(如細(xì)胞質(zhì))通常僅能

染上酸性染料，若把它們變?yōu)檫m宜的物理形式，也同樣能與堿性染料發(fā)

生吸附作用。

 

 

細(xì)菌的等電點(diǎn)較低，pH為2～5，而目前常用的培養(yǎng)基一般為中性、

堿性或弱酸性。微生物在這些培養(yǎng)基中生長后菌體蛋白質(zhì)電離后帶負(fù)電

荷，而堿性染料電離時染料離子帶正電荷．帶負(fù)電荷的細(xì)菌常和帶正電

荷的堿性染料進(jìn)行結(jié)合。因此，在細(xì)菌學(xué)上常用堿性染料對細(xì)菌菌體進(jìn)

行染色。